হাইব্রিডোমা কোষকে ফিউজ করতে কী ব্যবহার করা হয়?
হাইব্রিডোমা প্রযুক্তি মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি তৈরির অন্যতম প্রধান পদ্ধতি। হাইব্রিডোমা কোষ গঠনের জন্য মাইলোমা কোষের সাথে ইমিউন বি কোষগুলিকে ফিউজ করাই মূল বিষয়। এই নিবন্ধটি ফিউশন পদ্ধতি, মূল বিকারক এবং হাইব্রিডোমা কোষের অপারেটিং পদ্ধতিগুলির চারপাশে একটি কাঠামোগত বিশ্লেষণ পরিচালনা করবে এবং প্রাসঙ্গিক ডেটা তুলনা সংযুক্ত করবে।
1. হাইব্রিডোমা সেল ফিউশনের মূল পদ্ধতি

| ফিউশন পদ্ধতি | নীতি | সুবিধা | সীমাবদ্ধতা |
|---|---|---|---|
| পিইজি-মধ্যস্থ ফিউশন | পলিথিন গ্লাইকোল কোষের ঝিল্লিকে অস্থিতিশীল করে | কম খরচে এবং সহজ অপারেশন | ফিউশন রেট কম (প্রায় 1×10⁻⁵) |
| ইলেক্ট্রোফিউশন পদ্ধতি | উচ্চ-ভোল্টেজ ডাল ছিদ্র কোষ ঝিল্লি | উচ্চ ফিউশন দক্ষতা (80% পর্যন্ত) | সরঞ্জাম ব্যয়বহুল এবং প্রযুক্তিগত প্রয়োজনীয়তা বেশি |
| ভাইরাস-মধ্যস্থ ফিউশন | সেন্ডাই ভাইরাস মেমব্রেন ফিউশন প্ররোচিত করে | প্রাকৃতিক ফিউশন প্রক্রিয়া | জৈব নিরাপত্তা ঝুঁকি, দুর্বল প্রজননযোগ্যতা |
2. সাধারণত ব্যবহৃত রিএজেন্টের কর্মক্ষমতা তুলনা
| বিকারক প্রকার | সাধারণ পণ্য | একাগ্রতা | কর্ম সময় |
|---|---|---|---|
| PEG সমাধান | PEG1500 | 50% (w/v) | 1-2 মিনিট |
| ইলেক্ট্রোফিউশন বাফার | ম্যানিটল সমাধান | 0.3M | পালস সময় 10μs |
| স্ক্রীনিং মিডিয়া | HAT মাধ্যম | 1× | ক্রমাগত প্রশিক্ষণ |
3. অপারেশন প্রক্রিয়ার মূল ধাপ
1.সেল প্রিট্রিটমেন্ট: ইমিউন প্লীহা কোষ এবং মায়লোমা কোষ 5:1 অনুপাতে মিশ্রিত হয় এবং সিরাম প্রোটিন অপসারণের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়।
2.ফিউশন প্রতিক্রিয়া: ধীরে ধীরে পিইজি দ্রবণ যোগ করতে গ্রেডিয়েন্ট সেন্ট্রিফিউগেশন পদ্ধতি ব্যবহার করুন, এবং একটি 37°C জল স্নানে প্রতিক্রিয়া সময় সঠিকভাবে নিয়ন্ত্রণ করুন৷
3.নির্বাচনী সংস্কৃতি: হাইব্রিডোমা কোষ স্ক্রীন করতে HAT মাধ্যম (হাইপক্সানথিন-অ্যামিনোপ্টেরিন-থাইমিডিন ধারণকারী) ব্যবহার করুন।
4.ক্লোনাল সংস্কৃতি: সীমিত তরলীকরণ পদ্ধতির মাধ্যমে মনোক্লোনাল সেল লাইন প্রাপ্ত করুন, এবং ELISA দ্বারা অ্যান্টিবডি নিঃসরণ সনাক্ত করুন৷
4. প্রযুক্তিগত অপ্টিমাইজেশান দিক
| মাত্রা অপ্টিমাইজ করুন | নির্দিষ্ট ব্যবস্থা | প্রত্যাশিত প্রভাব |
|---|---|---|
| ফিউশন দক্ষতা | স্পন্দিত বৈদ্যুতিক ক্ষেত্রের পরামিতিগুলির অপ্টিমাইজেশন | 85% এর বেশি বেড়েছে |
| কোষ কার্যকলাপ | অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট যোগ করুন | বেঁচে থাকার হার 30% বৃদ্ধি পেয়েছে |
| স্ক্রীনিং গতি | স্বয়ংক্রিয় ক্লোন বাছাই | কাজের সময় 50% কমিয়ে দিন |
5. শিল্পের সাম্প্রতিক প্রবণতা (গত 10 দিনে হট স্পট)
1. "নেচার প্রোটোকল"-এর সর্বশেষ রিপোর্ট দেখায় যে মাইক্রোফ্লুইডিক চিপ ফিউশন প্রযুক্তি ব্যবহার করে হাইব্রিডোমা গঠনের দক্ষতা 90% অতিক্রম করতে পারে।
2. একটি সাংহাই জৈবিক কোম্পানি একটি নতুন ধরনের ইলেক্ট্রোফিউশন যন্ত্র প্রকাশ করেছে। এর পেটেন্ট ওয়েভফর্ম ডিজাইন কোষের মৃত্যুর হার 5% এর নিচে নিয়ন্ত্রণ করে।
3. CRISPR জিন এডিটিং প্রযুক্তি মায়লোমা সেল লাইনের রূপান্তরে প্রয়োগ করা শুরু হয়েছে, অ্যান্টিবডি নিঃসরণের স্থায়িত্বকে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করেছে।
সংক্ষেপে, হাইব্রিডোমা সেল ফিউশন প্রযুক্তি উচ্চ দক্ষতা এবং প্রমিতকরণের দিকে বিকাশ করছে। গবেষকদের পরীক্ষামূলক প্রয়োজন এবং সরঞ্জাম অবস্থার উপর ভিত্তি করে ঐতিহ্যগত PEG পদ্ধতি এবং উদীয়মান ইলেক্ট্রোফিউশন প্রযুক্তির মধ্যে একটি যুক্তিসঙ্গত পছন্দ করতে হবে।
বিশদ পরীক্ষা করুন
বিশদ পরীক্ষা করুন